Лекарственное средство для лечение вирусного гепатита С

                                                  Российская федерация

             Федеральная служба по интеллектуальной собственности

  

(12) Описание к изобретению патента  

(21)(22) Заявка: 2014141481/15,  15.04.2014

(24) Дата начала отчёта срока действия патента: 15.10.2014

Приоритет(ы):

(22) Дата подачи заявки: 15.10.2014

(45) Опубликовано: 20.11.2015  Бюл. № 32

(56) Список документов, цитированных в отчёте о поиске: EP 1394255 A2, 03.03.2004.  DATABASE, GenBank, V00642.1, 21.10.1996 [ найдено 11.06.2015] Найдено в интернет: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/ . RU 2409667 C2, 20.01.2011. RU 2158139 C1, 27.10.2000.  WO  9213081 A1, 06.08.1992.  DE WACHTER R. et al. Studies on the bacteriophage MS2. The untranslated 5'- terminal nucleotide sequence preceding the first cistron. Eur J Biochem. 1971 Oct. 14; 22(3): 400-414

              Адресс для переписки:

                                              125167,Москва, ул. Викторенко,5, стр.1, Виктория плаза, патентно-лицензионная фирма

                                               "  Транстехнология" , Курапову Г.П.

(54) Лекарственное средство для лечения вирусного гепатита С

(57) Реферат:        

          Изобретение относится к области медицины и генной инженерии и предназначено для лечения вирусного гепатита С  (ВГС). Предложено лекарственное средство, содержащие модифицированные псевдовирионы фага MS2, оболочка которых создана белками "А" и "В" фага MS2, а часть геномной РНК, Способной селективно уничтожать клетки, заражённые вирусом гепатита С или его РНК репликоном, при этом геном модифицированного псевдовириона фага MS2 характеризуется нуклеотидной последовательностью, соответствующей SEQ ID NO 1. Изобретение обеспечивает эффективное средство для лечения хронической ВГС - инфекции. 5 ил. табл 13 прим.


Изобретение относится к области медицины и генной инженерии и может быть использовано для лечения методом суийидной генотерапии вирусного гепатита С ( ВГС-инфекции ) всех известных генотипов.

В настоящее время проблемы с ВГС- инфекцией ( вирусом гепатита типа "С" ) приобрела глобальный характер из-за распространения вируса практически во всех странах, в том числе и Российской Федерации, где количество ВГС- инфицированных по официальной статистике приближается к 5 миллионам человек ( Богомолов П.О., Оказание медицинской помощи пациентам с хроническим гепатитом "С" , Доклад Главного гематолога МЗ Московской области, 2014 ) Острый гепатит С в большинстве случаев ( 70-85% ) переходит в хроническую инфекцию, которая часто течёт бессимптомно первые 10-15 лет, что затрудняет выявление и лечение ВГС. Как установлено, В США продолжительность жизни больных хроническим С сокращена на 8-12 лет,если у них не было эффективного курса противовирусной терапии ( Center for Disease Control and Prevention. HCV. http://www.cdc.gov/hepatitis/HCV . Accessed 8 Oct. 2010 ) В Российской Федерации почти у 40% пациентов с хроническим гепатитом С через 20-25 лет после инфицирования выявляется цироз печени ( Самохвалов Е.И., Николаева Л.И., Альховский С.В., и др. Частота встречаемости отдельных субтипов вируса гепатита С в Московском регионе. // Вопросы вирусологии. 2013, №1, с. 36-40 ). Основной целью лечения является уничтожение вируса и предотвращение развития отдалённых осложнений. Успешное лечение определяют как достижение устойчивого вирусологического ответа ( УВО ), который подтверждается нерегистрируемыми уровнями РНК ВГС ( HCV ), по меньшей мере, 6 месяцев после прекращения терапии ( Pearlman B.L., Hepatitis C treatment apdate. Am. J. Med. 2004; 117(5): 344-352). Вероятность завершить терапию эффективно, т.е. достичь УВО, которая включает в себя и нормализацию биохимических показателей печени, значительно выше, если терапия начата в острой фазе инфекции, но и в первые 10 лет течения хронического гепатита она больше, чем в более поздние сроки. Для ВГС характерна высокая частота генетических изменений, возникающих в процессе самовоспроизведения. Из этого следует, что практически у каждой вирусной частицы в последовательности геномной РНК есть хотя бы один и более нуклеотидов, по которым она отличается от предшественника. К настоящему времени, выделяют 7 генотипов, и 67 субтипов ВГС (Donald B. Smith, Jens Bukh, Carla Kuinen, A. Scott Muerhoff, Charles M. Rice, Jack T. Stapleton, Peter Simmonds // Expanded Classification of Hepatitis C Virus Into 7 Genotypes and 67 Subtypes: Updated criteria and Genotype Assignment Web Resource. HEPATOLOGY 2014 59[1] : 318-327

В настоящее время разработано достаточно много препаратов, применяемых для лечения и профилактики ВГС-инфекции, различающихся механизмами воздействия, способами введения,  и лекарственными формами.

Известно, что для лечения острой ВГС- инфекции хорошо зарекомендовали себя химические препараты - ингибиторы ВГС - специфических ферментов. Так например, известна композиция, обладающая иммуногенной активностью против ВИЧ, содержащая стериоизомеры алкил [2-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-метоксикарбониламино-ацетил)-пирролидин-2ил]-3H-имидазол-4-ил}-фенил-бута-1,3.-диинил]-1H-имидазол-2-ил}-пирролидин-1-ил)-2-оксо-этил]-карбаматов общей формулы 1, проявляющие высокую активность по отношению к вирусу гепатита С ( патент РФ № 2518369, приоритет от 07.02.2013). Однако, для лечения хронической формы ВНС- специфических ферментов оказалось не эффективной из-за низкой точности копирования матрицы и, как следствие, высокой частоты образования устойчивых форм.

Известно использование интерферонов для осуществления этиотропного лечения ВГС с доказанной эффективностью, включая антипролиферативное , иммуномодулирующее, противовирусное действие, а также участвуют в индукции дефференцировки клеток,из которых наиболее часто используемым, является интерферон-а [ National Institute of Health Consen-sus development conference statement:  Managment of hepatitis C 2002 // Hepatology. - 2002. - Vol. 36, N5 (suppl.1 ). - P. 3-19.]. Однако, при проведении противовирусной терапии необходимо контролировать не только эффективность лечения, но и проявления побочных эффектов, наиболее частым из которых является гриппоподобный синдром ( повышение температуры, слабость, головная боль, тошнота ), раздражительность, нейтропения, снижение аппетита, похудание, депрессия, тромбоцитопения, нарушение сна ( Лобзин Ю.В., Жданов К.В., Волжанин В.М., и др. ) Вирусные гепатиты: клиника, диагностика, лечение. -СПб.:  ООО " Издательство "ФОЛИАНТ ", 2003. -192 с. ). что достаточно часто  имеет место при использовании эффективности при лечении хронической формы ВГС.

Известно, что для лечения острой ВГС - нифекции хорошо зарекомендовали клинические протоколы, пользующие различные препараты интерферонов-а в сочетании с рибовирином ( US Patent 6277830, 6824768 ), нуклеозильные производные и другие ВГС-специфические ингибиторы ферментов ( US Patent 5308750, 6428792, 6692908, 6951646, 7105203, 7314919, 8603468, WO 2007111965, WO 2002008292, WO 200714370, US Patent Application 2005035735 ), пептидные или siРНК ингибиторы ВГС- специфических ферментов ( US Patent 7326536, US Patent Application 0070004635, WO 2006035061 ). Для повышения эффективности лечения и снижения нежелательных побочных эффектов применяют различные комбинации с использования интерферона, как например в патенте РФ 2394589, приоритет от 14.07.2004, где предлагается для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения вызываемой ВГС инфекции, использовать конъюгат интерферона-а с водорастворимым полимером в комбинации с рибовирином и циклоспорином А. Предполагается, что изобретение обеспечивает эффективное воздействие у пациентов с HCV инфекцией, которые изначальноне отвечали на монотерапию пэгилированным интерфероном, а также комбинацией интерферона альфа с рибовирином или интерферона с циклоспорином А. Однако, результаты клинического лечения с использованием указанных препаратов показывают уровень излечения не выше 50%. При этом , ВГС- инфицированные, которые после лечения интерфероном или препаратами на его основе относятся к группе так называемых " не отвечающих " , являются источником резистентных форм вируса. Клинические протоколы лечения ВГС-инфекции с помощью интерферонов-а в сочетании с рибовирином или другими ингибиторами ВГС - специфических ферментов увеличивают продолжительность периода появления резистентных форм вируса у хрончески ВГС-ифецированных, достоверно не снижая процент " не отвечающих ". Есть обоснованные предположения, что появлению резистентных форм вируса у хронически ВГС-инфицированных служат укороченные геномы ВНС ( РНК-репликоны ), способные к самостоятельной репликации в цитоплазме зараженной клетки в виде двунитевых РНК ( US Patent Application 20130115592 ).  Репликация двунитевых РНК не приводит к формированию вирусных частиц, но служит субстратом для образования рекомбинантных структур и восстановлению способности к формированию инфекционных вирусных частиц ( US Patent Application 20130115592 ). Всё это заставляет искать новые комбинационные подходы к лечению ВГС- инфекции, особенно прихроническом течении (  US Patent Application 20140127158 ).

Последние достижения, касающиеся лечения хронического течения ВГС-инфекции, основаны на использовании высокоспецифичных ингибиторов вирусных ферментов (DAA - direct acting antiviral - прямое антивирусное действий ) ( Pamela S. Belperio, PharmD, BCTPS, AAHIVE National Public Health Clinical Pharmacist VA Office of Public Health/ Population Health. Chronic Hepatitis C Viruc ( HCV ) Infection: Treatment   Considerations from the Department of  Veterans Affairs National Hepatitis C Resource Center Program and the Office of Public Health;  last revised on May 13,2014 ) Эти препараты найдены в экспериментах на клеточных культурах , содержащих РНК-репликоны ВГС ( эксперименты in vitro ), что косвенно свидетельствует о признании роли РНК-репликонов в развитии патологии у инфицированных вирусом людей ( in vivo ). Результаты клинических испытаний DAA терапии людей с хронической формой ВГС-инфекции показывают эффективность 85%. Однако, стоимость такого лечения состовляет не менее $30 тыс. Кроме того, применяемые протоколы DAA терапии лечения хронической ВГС-инфекции, приводят, зачастую, к возникновению устойчивых вариантов ( с частотой 0,5%; S. Margeridon- Thermet, R.W. Shafer. Comparison of the Mechanisms of Drug Resistance among HIV , Hepatitis B, Hepatitis C // Viruses 2010, v.2 (12), pp. 2696-2739 ). Механизмом, лежащим в основе появления устойчивых форм, зачастую, является РНК рекомбинационные события ( E. Simon-Loriere, E.C. Holmes, Who do RNA viruses recombine? // Nat Rev Microbiol. 2011, v. 9 (8) : 617-626; Domingo E.J., Sheldon, C. Perales. Viral Quasispecies Evolution // Microbiology and Molecular Biology Reviews Jone 2012 v. 76(2) p. 159-216.

Таким образом, применяемые в настоящее время препараты и композиции, позволяют повысить эффективность лечения и профилактики ВГС, однако нигде не говорится о полной стерилизации организма от вируса. Отсутствие такой стерилизации, согласно имеющимся данным в отношении клинического течения ВГС, приводит, спустя длительный период, к "новому" появлению вируса или его рекомбинантных форм. 

Известны примеры использования для стерилизации организма от вирусов так называемой "суицидальной генотерапии". В качестве суицидальной терапии ( около 12% клинических протоколов FDA )различных вирусных инфекций, ( http://www.eurolab.ua/encyclopedia/287/5966/ ) применяются гены тимидин киназы  вируса простого герпеса ( HSV-TK; Goebel, E.A., Devidson B.L., Graham S.M., Kern J.A., Tumor reduction in vivo after adenoviral mediated gene transfer of the herpes simplex virus trymidine kinase gene and ganciclowir treatment in human head and neck squamous cell carcioma // Otolaryngology and Head and Neck Surgery 1998, v. 119, pp. 331-336), бактериального гена дезаминазы 2-окси-6-аминопиримидина ( CD; Mulen C.A., M. Kilstrup, R.M. Blaese.: Transfer of the bacterial gene for cytosine deaminase to mammalian cells confers lethal sensitivity to 5 fluorocytosine: a negative selection system // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1992, v.89, №1, pp. 33-37 ) или фрагмент гена токсина дифтерии (DT-A) , кодирующий моно АДФ-рибозил трансферазу дифтамина фактора элонгации EF-2 ( Qiao J., Caruco M.: PG 13 Packaging Cells Produce Recombinant Retroviruses Carrying a Diphtheria Toxin Mutant Which Kills Cancer Cells // J. Virology July 2002, vol. 76, №14, p. 7343-7348 ). Последовательность гена токсина дифтерии исключительно устойчива к аминокислотным заменам и ошибкам трансляции. Кроме того, его активность не требует введения в организм дополнительных низкомолекулярных субстратов ( Corda D., Di Girolamo M. Functional asperts of protein mono-ADPribosylation // The EMBO Journal 2003, v. 22, №9, pp. 1953-1958 ). Белок обладает высокой токсичностью, благодаря которой, единственная целая молекула или её DT-A  фрагмент, способна убить клетку ( Yamaizumi M., Uchida T., Y. Okada. : One molekule of diphtheria toxin fragment A introduced into a cell can kill the cell // Cell 1978, v. 15, pp. 245-250) Одной из видов "суицидальной генотерапии" является технология АГП ( антивирусной генетической программы ), обеспечивающая селективное уничтожение клеток,



                              ПРОДОЛЖЕНИЕ СЛЕДУЕТ









Написать отзыв

Внимание: HTML не поддерживается! Используйте обычный текст.
    Плохо           Хорошо

Популярные Статьи

Как приготовление пищи на газовой плите влияет на развитие онкологии?

Как приготовление пищи на газовой плите влияет на развитие онкологии?

Большинство людей, живущих в цивилизованных странах мира готовят пищу с помощью газовой плиты. Все мы привыкли считать такой вид приготовления самым удобным и разнообразным. Однако не так давно и..

Онкология лечится СТОпроцентно - Принцип работы препарата

Онкология лечится СТОпроцентно - Принцип работы препарата

В этой статье мы опишем в общих чертах механизм, которым происходит лечение этим препаратом. В любом организме млекопитающих существует группа клеток которая отвечает за защиту организма от инфекции.Э..

Повороты судьбы

Повороты судьбы

Онкологические заболевания в мире на сегодняшний день занимают вторую строчку по смертности, после сосудисто — сердечных. Интересный факт, что ни сосудисто — сердечные, ни онкологические болезни не пе..

Закрытие национальной онкологической программы

Закрытие национальной онкологической программы

Тревожные новости прошли несколько недель назад в ведущих СМИ. Правозащитники, пациенты и врачи настоятельно требуют провести тщательную ревизию онкологической службы: составить подробную опись ..